En la investigación biológica, los polipéptidos con una secuencia larga generalmente se usan. Para los péptidos con más de 60 aminoácidos en la secuencia, la expresión génica y SDS-PAGE generalmente se usan para obtenerlos. Sin embargo, este método lleva mucho tiempo y el efecto final de separación del producto no es bueno.
Desafíos y soluciones para una larga síntesis de péptidos
En la síntesis de péptidos largos, siempre nos enfrentamos a un problema, es decir, el obstáculo estérico de la reacción de condensación aumenta con el aumento de la secuencia en la síntesis, y el tiempo de reacción debe ajustarse para completar la reacción. Sin embargo, cuanto más tiempo se produce el tiempo de reacción, más efectos secundarios se producen y se forma una porción del péptido objetivo. Dichos residuos: las cadenas de péptidos deficientes son impurezas clave producidas en la síntesis de péptidos largos. Por lo tanto, en la síntesis de péptido largo, el problema clave que debemos superar es explorar las condiciones de reacción de alta calidad y los métodos de reacción, a fin de hacer que la reacción de condensación de aminoácidos sea más integral y llena. Además, reduzca el tiempo de reacción, porque cuanto más tiempo sea el tiempo de reacción, más reacciones laterales incontrolables, más complejas son los subproductos. Por lo tanto, se resumen los siguientes tres puntos:
Se puede usar síntesis de microondas: Para algunos aminoácidos encontrados en el proceso de síntesis que no son fáciles de integrar, se puede usar síntesis de microondas. Este método tiene resultados notables y reduce en gran medida el tiempo de reacción y reduce la formación de dos subproductos clave.
Se puede usar el método de síntesis de fragmentos: Cuando algunos péptidos son difíciles de sintetizar por métodos de síntesis comunes y no son fáciles de purificar, podemos adoptar toda la condensación de varios aminoácidos en un cierto segmento del péptido a la cadena de péptidos en su conjunto. Este método también puede resolver muchos problemas en la síntesis.
Se puede usar síntesis de acilhidrazida: La síntesis de acilhidrazida de péptidos es un método de síntesis de fase sólida de péptido Cys N-terminal y reacción selectiva química de hidrazida de polipéptido C-terminal entre la formación de enlaces de amida para lograr el método de unión de péptidos. Basado en la posición de Cys en la cadena de péptidos, este método divide toda la cadena de péptidos en múltiples secuencias y las sintetiza respectivamente. Finalmente, el péptido objetivo se obtiene a través de la reacción de condensación de fase líquida. Este método no solo reduce en gran medida el tiempo de síntesis de péptido largo, sino que también aumenta significativamente la pureza del producto final.
Purificación de péptidos largos
La particularidad de los péptidos largos inevitablemente conduce a componentes complejos de péptidos crudos. Por lo tanto, también es un desafío purificar péptidos largos por HPLC. Serie amiloide de proceso de purificación de polipéptidos, absorbiendo mucha experiencia y utilizada con éxito en la purificación de péptidos largos. Al adoptar nuevos equipos, la mezcla de múltiples sistemas de purificación, separación repetida y otros métodos de experiencia, la tasa de éxito de la purificación larga de péptidos mejoró en gran medida.
Tiempo de publicación: 2025-07-03