En la investigación biológica se suelen utilizar polipéptidos con una secuencia larga.Para péptidos con más de 60 aminoácidos en la secuencia, generalmente se utiliza la expresión génica y SDS-PAGE para obtenerlos.Sin embargo, este método lleva mucho tiempo y el efecto de separación del producto final no es bueno.
Desafíos y soluciones para la síntesis de péptidos largos.
En la síntesis de péptidos largos, siempre nos enfrentamos a un problema, es decir, el impedimento estérico de la reacción de condensación aumenta con el aumento de la secuencia en la síntesis, y es necesario ajustar el tiempo de reacción para completar la reacción.Sin embargo, cuanto mayor es el tiempo de reacción, más efectos secundarios se producen y se forma una porción del péptido diana.Estos residuos (cadenas peptídicas deficientes) son impurezas clave que se producen en la síntesis de péptidos largos.Por lo tanto, en la síntesis de péptidos largos, el problema clave que debemos superar es explorar las condiciones y métodos de reacción de alta calidad, para que la reacción de condensación de aminoácidos sea más completa y completa.Además, reduzca el tiempo de reacción, porque cuanto mayor sea el tiempo de reacción, más reacciones secundarias incontrolables y más complejos serán los subproductos.Por tanto, se resumen los siguientes tres puntos:
La síntesis por microondas se puede utilizar: Para algunos aminoácidos que se encuentran en el proceso de síntesis y que no son fáciles de integrar, se puede utilizar la síntesis por microondas.Este método tiene resultados notables, reduce en gran medida el tiempo de reacción y reduce la formación de dos subproductos clave.
Se puede utilizar el método de síntesis de fragmentos.: Cuando algunos péptidos son difíciles de sintetizar mediante métodos de síntesis comunes y no son fáciles de purificar, podemos adoptar la condensación completa de varios aminoácidos en un determinado segmento del péptido para formar la cadena peptídica en su conjunto.Este método también puede resolver muchos problemas de síntesis.
Se puede utilizar la síntesis de acilhidrazida.: La síntesis de péptidos con acilhidrazida es un método de síntesis en fase sólida del péptido Cys N-terminal y la reacción química selectiva de hidrazida polipéptido C-terminal entre la formación de enlaces amida para lograr el método de enlace peptídico.Según la posición de Cys en la cadena peptídica, este método divide toda la cadena peptídica en múltiples secuencias y las sintetiza respectivamente.Finalmente, el péptido diana se obtiene mediante una reacción de condensación en fase líquida.Este método no sólo reduce en gran medida el tiempo de síntesis del péptido largo, sino que también aumenta significativamente la pureza del producto final.
Purificación de péptidos larga
La particularidad de los péptidos largos conduce inevitablemente a componentes complejos de los péptidos crudos.Por lo tanto, también supone un desafío purificar péptidos largos mediante HPLC.Serie amiloide del proceso de purificación de polipéptidos, que absorbe mucha experiencia y se utiliza con éxito en la purificación de péptidos largos.Mediante la adopción de nuevos equipos, la mezcla de múltiples sistemas de purificación, la separación repetida y otros métodos experimentados, la tasa de éxito de la purificación prolongada de péptidos mejoró enormemente.
Hora de publicación: 18-abr-2023