La modificación de la fosforilación juega un papel crucial en la vida de las células y afecta múltiples aspectos. La fosforilación de proteínas está estrechamente relacionada con varios procesos biológicos, como la reparación del daño del ADN, la regulación transcripcional, la transducción de señales y la regulación de la apoptosis celular. El estudio de proteínas y péptidos fosforilados ayuda a revelar los mecanismos de estos procesos y profundizar nuestra comprensión de la esencia de las actividades de la vida. La biotecnología del péptido Hong posee tecnología de etiquetado de péptidos de fosforilación madura. Aprovechando sus propias ventajas tecnológicas y de materia prima, podemos sintetizar péptidos que contengan serina fosforilada (PSER), treonina fosforilada (PTHR) y tirosina fosforilada (PTYR), y proporcionan péptidos de alta calidad con uno a cinco sitios de fosforilación.
Descripción general de la tecnología de marcado de fosforilación:
Los péptidos fosforilados se refieren principalmente a los grupos hidroxilo de la cadena lateral de los residuos de serina (SER), tirosina (Tyr) y treonina (THR) en la cadena de péptidos que se modifican en ésteres fosfatos ácidos. Los péptidos fosforilados juegan un papel crucial en el estudio de la fosforilación de proteínas. Por lo tanto, es particularmente importante explorar profundamente las reacciones de fosforilación de proteínas y péptidos y encontrar métodos sintéticos maduros y simples.
En la actualidad, los métodos para la modificación de la fosforilación de péptidos se dividen principalmente en dos categorías:
(1) Incorporar directamente los aminoácidos fosforilados protegidos apropiadamente en la secuencia de péptidos:
Primero, los aminoácidos que necesitan ser fosforilados (como THR, Ser o Tyr) están sujetos a tratamiento de fosforilación y protegidos adecuadamente. Luego, después del proceso convencional de síntesis de péptidos de fase sólida (SPPS), los monómeros fosforilados están vinculados a los sitios específicos del polipéptido. Este método es fácil de operar y se ha convertido en una de las principales técnicas para la modificación de los péptidos de fosforilación puntual.
(2) Después de sintetizar la secuencia de polipéptidos en la resina, los grupos hidroxilo de la cadena lateral de Ser, Tyr o THR están fosforilados:
Al realizar la modificación de la fosforilación, si se adopta el método de condensar directamente los monómeros fosforilados en el polipéptido, el aminoácido fosforilado, debido a su cadena lateral más grande, provoca un aumento en el impedimento estérico, lo que dificulta la condensación con la cadena de péptidos. Además, la introducción de aminoácidos posteriores también se volverá relativamente compleja, especialmente cuando hay múltiples sitios de fosforilación. El proceso de síntesis será extremadamente difícil, y el producto final será muy complejo, lo que dificulta la separación y el rendimiento es extremadamente bajo. Por lo tanto, cuando hay múltiples sitios que requieren fosforilación en la cadena de polipéptidos, se puede considerar para completar la síntesis de la secuencia de polipéptidos en la resina primero, y luego fosforila los grupos hidroxilo de la cadena lateral de Ser, Tyr o THR. Durante este proceso, primero retire selectivamente los grupos de protección de la cadena lateral del aminoácido a etiquetar. Para Tyr y THR, los aminoácidos desprotegidos de sus cadenas laterales se pueden reaccionar directamente. Los grupos de protección de la cadena lateral se pueden eliminar cuantitativamente bajo la condición de 1% de TFA/DCM. En este método, el intermedio activo de bis-bencil fosforamidato y tetrazol se puede generar mediante la reacción con este último, y puede vincularse al grupo hidroxilo. Luego, se puede llevar a cabo una reacción de oxidación en condiciones de ácido de peróxido para generar el grupo de fosfonilo, completando la fosforilación.
Tiempo de publicación: 2025-07-16