La resistencia química de los péptidos depende de la composición y secuencia de aminoácidos. Los péptidos liofilizados son generalmente más duraderos que sus contrapartes en solución. Los métodos de degradación potenciales de los péptidos son los siguientes:
1, Hidrólisis: esto generalmente se incluye en el ASP en la secuencia (d) Para el problema en el péptido, se deshidrata muy fácilmente para formar un anillo imida intermedio. Por ejemplo, hay ASP en la secuencia. -Pro (dp) En este caso, el intermedio de imida en forma de anillo producido por catálisis ácido conduciría a la escisión de la cadena de péptidos. Del mismo modo, ASP-Gly (DG) está presente en la secuencia y, en este caso, el intermedio circular puede hidrolizarse en el modo ASP original de ácido isopartico (inofensivo) o un análogo potencialmente inactivo. Finalmente, todos los patrones de ácido aspártico podrían convertirse por completo en análogos de ácido isopartico. "En un nivel más pequeño, contiene ser (s), una secuencia que también forma un intermedio circular de imida que finalmente limpia la cadena de péptidos".
2, desamidación: esta reacción catalizada por la base a menudo ocurre en presencia de ASN-Gly (NG) o Gln-Gly (QG) en la secuencia y sigue un mecanismo de secuencia ASP-Gly (DG) similar. La desaminación (pérdida de amina) en la secuencia del gly de ASN produce un intermedio de imida cíclica, que luego se hidroliza para producir ácido asparto o análogos de ácido isoparto. Además, el intermedio de imitación anillo puede causar D-ASP o brotación externa a ASND-iso, algo similar a ASP, todo lo cual puede ser inactivo.
3, Oxidación: los residuos CYS y MET son los principales residuos que sufren oxidación reversible. La oxidación de la cisteína se acelera a valores de pH más altos, donde el tiol elimina más fácilmente la protonación y es propenso a generar enlaces disulfuro entre las cadenas o entre las cadenas. El enlace disulfuro se puede revertir fácilmente mediante el tratamiento con hidrocloruro de ditiotreitol (DTT) o Tris (2-carboxiletilfosfina) (TCEP). La metionina se oxida por químicos y fotoquímicos para producir dióxido de metionina, que ingresa además al dióxido de metionina, los cuales son difíciles de revertir.
4, Producción de dicketopiperazina y ácido piroglutámico: la formación de dimetilpiperazina generalmente ocurre cuando Gly está en la tercera posición del extremo N, especialmente si Pro o Gly está en la posición 1 o 2. Esta reacción implica un ataque nucleofílico de los dos ácidos de nitrógeno N-ácido de los dos ácidos de los dos ácidos de los dos años de los dos de los dos años. Método de diketopiperazine. Por otro lado, si GLN se encuentra en el extremo N, la formación de ácido piroglutámico es casi inevitable. Esta es una reacción similar en la que el nitrógeno N-terminal ataca el carbono de la base de la cadena lateral de GLN para formar la desaminación de un análogo del péptido de piroglutamilo. Esta conversión también ocurre con los análogos de péptidos de piroglutamato que contiene piroglutamato.
5. Racemización: este término se usa ampliamente para referirse a la pérdida general de la integridad quiral de un aminoácido o péptido. La racemización implica la conversión de un aminoácido de un enantiómero catalizado base, generalmente en forma de L, a tipo 1 de los enantiómeros de forma L y D. : 1. Mezcla. Esto es más importante durante la generación de péptidos, pero menos problemático en el péptido terminado. Además, el interruptor es difícil de detectar y no se puede controlar.
Un enfoque general para evitar o minimizar la degradación del péptido es degradar el péptido a-20 ° C o mejor-80 ° C para el almacenamiento liofilizado, si está disponible. Si el péptido está en solución acuosa, cada muestra de alícuota debe congelarse para evitar la congelación y la descongelación. Se debe evitar la exposición al pH y GT; Medio 8. Sin embargo, si se requiere ph & gt; Si el péptido se derrite a los 8, su exposición debe ser mínima.
Tiempo de publicación: 2025-07-01